His标签蛋白纯化的挑战

His标签是一种专为重组蛋白纯化而设计的标签，通常由6-10个组氨酸残基构成。由于其相对较小的分子量，对目标蛋白的性质影响较小，这使其成为目前应用最广泛的标签之一。在His标签蛋白纯化的过程中，标签与金属离子间的结合强度是关键因素。然而，这一过程受到多种因素的影响，如镍离子的配位情况、标签的长度、标签在蛋白中的位置（C端或N端）、标签的暴露程度以及缓冲液的pH值等。在实际的纯化过程中，常常会遇到标签蛋白挂柱不牢或流失严重的问题，导致目标蛋白的纯度下降和收率低下，甚至出现目标蛋白完全不结合的情况。

新型镍亲和纯化材料

为了克服传统Ni亲和介质在His标签蛋白纯化过程中的不足，尊龙凯时推出了VDXNTANiultra，特别适合于处理那些在传统Ni介质中挂柱不充分或流失较大的His标签蛋白。

应用案例分析

在实验中，我们使用传统的Ni-NTA和VDXNTANiultra在相同的条件下对同一标签蛋白进行纯化。结果显示，在相同的上样条件下，传统Ni-NTA在结合和洗杂过程中均发生了大量目标蛋白的损失，显著降低了回收率。而VDXNTANiultra在对目标蛋白的结合力上表现更优秀，结合和洗杂过程中的蛋白损失显著降低，回收率明显高于传统Ni-NTA。

层析条件

• 层析柱：VDXNTANiultra、传统Ni-NTA
• 柱体积：5mL，柱高10cm
• 样品来源：大肠杆菌裂解液
• 平衡液：50mM PB，300mM NaCl，pH 8.0
• 洗脱液：50mM PB，300mM NaCl，500mM咪唑，pH 8.0
• 流速：1mL/min

尊龙凯时的VDXNTANiultra凭借更优越的亲和特性，正在为生物医药领域的蛋白纯化提供新的解决方案，助力科研人员提高目标蛋白的纯度和回收率。